2-1-3- مگسهای سیاه 10 2-1-4- مایت های ماکیان 10 2-1-5- لارومایت ها 10 2-1-6- سوسک بستر و لارو آن آلفیتوبیوس دپاپرینوس 11 2-1-7- مایت های پر و مایت های ایجادکننده پرریزی 11 2-1-8- مایت های زیر پوستی 11 2-2- انگل های داخلی 12 2-2-1- کیسه ملتحمه 12 2-2-2- نای 13 2-2-4- پیش معده 14 2-2-5- سنگدان 14 2-2-6- روده باریک 15 2-2-7- روده کور 16 2-2-8- پوست 17 2-3- بیماری های انگلی طیور 17 2-3-1- کوکسیدیوز 17 2-3-2- کریپتوسپوریدیوز 20 2-3-3- هگزامیتیازیس 24 2-3-4- هیستومونیازیس 27 2-3-5- لکوسیتوزئونوز 32 2-4- واکنش زنجیر های پلی مراز( PCR ) 35 2-4-1- مواد و وسایل لازم برای انجام برای انجام آزمایش PCR 36 2-4-2- سنتز 36 2-4-3- تشخیص و تجزیه فراورده های PCR: 37 3-1- نمونه گیری 40 3-2- استخراج DNA از کبد با استفاده از کیت 40 3-3- استخراج DNA از خون با استفاده از کیت 41 3-4- آزمایش PCR 42 3-4-1- روش کار 42 3-5- تهیه ژل آگارز 43 3-5-1- مواد و وسایل لازم 43 3-5-2- روش تهیه بافر (1X) TBEبرای تهیه ژل آگارز 44 3-5-3- روش تهیه ژل آگارز 44 3-5-4- روش انجام الکتروفورز 44 3-5-5- آنالیز محصول PCR: 45 3-6- آزمایشات هیستوپاتولوژی 45 3-6-1- رنگ آمیزی هماتوکسیلین-ائوزین (H&E) : 45 3-6-2- روش رنگ آمیزی اسلاید با رنگ (H&E) : 46 3-6-3- تفسیر رنگ آمیزی (H&E) 47 3-6-4- نتایج رنگ آمیزی (H&E) 48 4-1- نتایج کیفی مربوط به استخراج DNA 50 4-2- نتایج آزمایشات هیستوپاتولوژی 51 5-1- بحث 53 5-2- پیشنهادات 56 منابع 57 فهرست شکل ها عنوان                                             صفحه شکل 4-1- الکتروفورز محصولات PCR به منظور تکثیر ژن انگل هیستومونیازیس در نمونه های خون و کبد بوقلمون بر روی ژل آگارز 1%. 50 شکل 4-2- مشاهده مقاطع انگل هیستوموناد در بین هپاتوسیت های کبدی. 51 فهرست جداول عنوان                                             صفحه جدول 4-1- مقایسه روش ردیابی از طریق PCR و آزمایشات هیستوپاتولوژی 51

چکیده

به منظور ردیابی هیستوموناس مله اگریدیس در بوقلمون های کشتار شده در استان اصفهان، 200 نمونه خون و 200 نمونه کبد در کشتارگاه اخذ شد و پس از استخراج DNA، قطعه 550 جفت بازی مربوط به ژن 18SRNA تکثیر شد. علاوه بر آن، نمونه های کبد در فرمالین 10% نگهداری و پس از تهیه مقاطع پاتولوژی رنگ آمیزی با هماتوکسیلین – ائوزین از نظر وجود انگل مورد بررسی قرار گرفت. نتایج PCR نشان داد از 200 نمونه خون، 18 نمونه (9%) و از تعداد 200 نمونه کبد، 32 نمونه (16%) از لحاظ هیستوموناس مله اگریدیس مثبت می باشد. نتایج هیستوپاتولوژی نشان داد از بین نمونه های PCR مثبت