فصل اول: مقدمه

 

1.1- پیوند کلیه ……………………………………………………………………………………………………………………. 2

 

2.1- رد پیوند کلیه ………………………………………………………………………………………………………………. 4

 

3.1- رد حاد پیوند ……………………………………………………………………………………………………………….. 4

 

4.1- DGF ……………………………………………………………………………………………………………………………. 6

 

5.1- آنتی بادی های ضد HLA …………………………………………………………………………………………. 6

 

6.1- آنتی بادی علیه آنتی ژن های گروه خونی ……………………………………………………………….. 7

 

7.1- افزایش سن اهدا کننده و دریافت کننده پیوند ……………………………………………………….. 7

 

8.1- اهدا کننده بافت ………………………………………………………………………………………………………….. 8

 

9.1- استرس اکسیداتیو و آنتی اکسیدانت­ها …………………………………………………………………….. 8

 

10.1- کاتالاز ………………………………………………………………………………………………………………………… 9

 

11.1- NAD(P)H کوئینون اکسیدوردوکتاز1 ………………………………………………………………… 11

 

12.1- هدف…………………………………………………………………………………………………………………………. 12

 

13.1- فرضیه ……………………………………………………………………………………………………………………… 12

 

 

 

 

 

 

 

 

 

عنوان                                                                                                                      صفحه

 

 

 

فصل دوم: بر تحقیقات پیشین

 

1.2- مطالعات انجام شده بر روی ژن کاتالاز …………………………………………………………………….. 14

 

2.2- مطالعات انجام شده بر روی ژن NQO1 ………………………………………………………………….. 16

 

3.2- مطالعات پیشین انجام شده در خصوص پیوند کلیه ………………………………………………. 18

 

 

 

فصل سوم: مواد و روش ها

 

1.3- نمونه­گیری …………………………………………………………………………………………………………………. 20

 

2.3- وسایل مورد نیاز …………………………………………………………………………………………………………. 21

 

3.3- محلول­های استفاده شده جهت استخراج DNA از نمونه خون کامل ………………….. 21

 

4.3- محلول­های استفاده شده جهت استخراج DNA از نمونه بافی­کت ………………………. 21

 

5.3- مواد لازم جهت انجام PCR ……………………………………………………………………………………… 22

 

6.3- مواد لازم جهت انجام الکتروفورز ……………………………………………………………………………… 22

 

7.3- مواد استفاده شده جهت اثر دادن آنزیم محدود­کننده ……………………………………………. 22

 

8.3- استخراج DNA از خون محیطی …………………………………………………………………………….. 22

 

9.3- استخراج DNA از بافی­کت با کیت DNP ……………………………………………………………… 23

 

10.3- PCR ……………………………………………………………………………………………………………………….. 24

 

11.3- الکتروفورز ………………………………………………………………………………………………………………… 27

 

12.3- رنگ­آمیزی ژل ………………………………………………………………………………………………………… 28

 

13.3- تحلیل آماری …………………………………………………………………………………………………………… 29

 

 

 

 

 

 

 

 

 

عنوان                                                                                                                      صفحه

 

 

 

فصل چهارم: نتایج

 

1.4- مشخصات افراد شرکت کننده در این مطالعه …………………………………………………………. 31

 

2.4- نتایج حاصل از بررسی ریسک فاکتور­های دخیل در رد پیوند کلیه

 

و مشخصات بیماران ……………………………………………………………………………………………………………. 31

 

3.4- نتایج حاصل از بررسی چند­شکلی ژن CAT در افراد سالم

 

و بیماران پیوند کلیه …………………………………………………………………………………………………………….. 33

 

4.4- نتایج حاصل از بررسی چند­شکلی ژن NQO1 در افراد سالم

 

 

و بیماران پیوند کلیه …………………………………………………………………………………………………………… 34

 

5.4- مقایسه فراوانی ژنوتیپی و آللی بین دو گروه سالم و بیمار ……………………………………. 35

 

6.4- مقایسه فراوانی ژنوتیپی و آللی بین بیماران با رد حاد پیوند

 

و بیماران فاقد رد حاد پیوند ………………………………………………………………………………………………… 36

 

7.4- بررسی ارتباط ژنوتیپ­های ژن CAT و NQO1 با ریسک

 

فاکتور­های رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………………………………………………… 38

 

 

 

فصل پنجم: بحث و نتیجه­گیری

 

بحث و نتیجه­گیری ………………………………………………………………………………………………………………. 40

 

پیشنهادات …………………………………………………………………………………………………………………………….. 45

 

 

 

فهرست منابع و مأخذ ……………………………………………………………………………………………………………. 46

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

فهرست جداول

 

 

 

 

 

عنوان                                                                                                                      صفحه

 

 

 

جدول 1.3- ……………………………………………………………………………………………………………………………….. 20

 

جدول 2.3- مواد مورد نیاز جهت تهیه مخلوط واکنش PCR ……………………………………………… 24

 

جدول 3.3- برنامه تنظیم شده برای واکنش PCR جهت تکثیر ژن NQO1 …………………….. 25

 

جدول 4.3- قطعات حاصل از هضم آنزیمی برای ژنوتیپ­های

 

چند­شکلی ژنتیکی NQO1 ……………………………………………………………………………………………………….. 26

 

جدول 5.3-  برنامه تنظیم شده برای واکنش PCR جهت تکثیر ژن CAT ……………………….. 26

 

جدول 6.3-  قطعات حاصل از هضم آنزیمی برای ژنوتیپ های

 

چندشکلی ژنتیکی CAT …………………………………………………………………………………………………………… 27

 

جدول 1.4-  بررسی ریسک فاکتورهای دخیل در رد پیوند کلیه

 

و مشخصات بیماران …………………………………………………………………………………………………………………… 32

 

جدول 2.4-  بررسی ریسک فاکتورهای کمی دخیل در رد پیوند کلیه

 

و مشخصات بیماران …………………………………………………………………………………………………………………… 33

 

جدول 3.4- مقایسه ژنوتیپ های ژن CAT در گروه سالم و بیمار پیوند کلیه ……………………. 33

 

جدول 4.4- مقایسه ژنوتیپ های ژن NQO1 در گروه سالم و بیمار پیوند کلیه ……………….. 34

 

جدول 5.4- آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژنCAT  در بین گروه سالم

 

و بیماران پیوند کلیه ………………………………………………………………………………………………………………….. 35

 

جدول 6.4- آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژنNQO1  در بین گروه سالم

 

و بیماران پیوند کلیه ………………………………………………………………………………………………………………….. 35

 

عنوان                                                                                                                      صفحه

 

 

 

جدول 7.4- آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی در ژن CAT

 

در بین بیماران پیوند کلیه ………………………………………………………………………………………………………. 37

 

جدول 8.4- آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی در ژن NQO1

 

در بین بیماران پیوند کلیه ………………………………………………………………………………………………………… 37

 

جدول 9.4- اثر ریسک فاکتور منبع بافتی باژنوتیپ های ژنCAT ……………………………………… 38

 

جدول 10.4- اثر ریسک فاکتور منبع بافتی باژنوتیپ های ژن NQO1 ……………………………… 38

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

فهرست شکل­ها

 

 

 

 

 

عنوان                                                                                                                      صفحه

 

 

 

شکل 1.1- ساختار ژن CAT و چند­شکلی ژنتیکی CAT C-262T …………………………………….. 10

 

شکل 2.1- ساختار ژن NQO1 و چند­شکلی ژنتیکی NQO1 C609T ………………………………. 11

 

شکل 1.3- نتایج حاصل از PCR-RFLP چند­شکلی ژنتیکی CAT C-262T

 

قابل مشاهده بر روی ژل آگاروز ………………………………………………………………………………………………… 28