1-1-       پیوندکلیه ……………………………………………………………………………………………………………….

 

 

2

 

 

 

1-2-       رد پیوند …………………………………………………………………………………………………………………

 

 

3

 

 

 

   1-2-1- رد فوق حاد ………………………………………………………………………………………………………

 

 

3

 

 

 

   1-2-2-  رد حاد ……………………………………………………………………………………………………………..

 

 

4

 

 

 

   1-2-3- رد مزمن ……………………………………………………………………………………………………………

 

 

4

 

 

 

1-3-       پیشگیری از رد آلوگرافت ………………………………………………………………………………………

 

 

5

 

 

 

1-4-       استرس اکسیداتیو ………………………………………………………………………………………………….

 

 

7

 

 

 

1-5-       گلوتاتیون پراکسیداز 1 (GPX1) …………………………………………………………………………..

 

 

8

 

 

 

1-6-       سوپراکسیددسموتاز1 (SOD1) …………………………………………………………………………….

 

 

9

 

 

 

1-7-       هدف ………………………………………………………………………………………………………………………

 

 

11

 

 

 

1-8-       فرضیه …………………………………………………………………………………………………………………….

 

 

11

 

 

 

 

فصل دوم: بر تحقیقات انجام شده

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

پایان نامه

 

2-1- مطالعات انجام شده بر روی چند شکلی GPX1 pro198leu و ارتباط آن با بیماری­های گوناگون ……………………………………………………………………………………………………………

 

 

 

13
2-2- مطالعات انجام شده بر روی چند شکلی SOD1 A251G و ارتباط آن با بیماری­ های گوناگون………………………………………………………………………………………………………………………..

 

 

 

14
2-3- مطالعات انجام شده بر روی رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………….. 15

 

 

 

فصل سوم: مواد و روش انجام کار

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

3-1- نمونه­گیری ………………………………………………………………………………………………………………… 18
3-2- وسایل مورد استفاده …………………………………………………………………………………………………. 19
3-3- مواد مورد استفاده …………………………………………………………………………………………………….. 19
   3-3-1- محلول­های لازم جهت استخراج ……………………………………………………………………… 19
   3-3-2- مواد استفاده شده جهت انجام PCR ………………………………………………………………. 20
   3-3-3- مواد استفاده شده جهت انجام الکتروفورز ……………………………………………………….. 20
   3-3-4- مواد استفاده شده جهت اثر دادن آنزیم محدود کننده ………………………………….. 20
3-4- استخراج DNA به روش جوشاندن (Boiling) ………………………………….. ………………. 21
   3-4-1- ساخت محلول­های مورد نیاز جهت استخراج ………………………………………………….. 21
   3-4-2- فرآیند استخراج به روش جوشاندن …………………………………………………………………. 21
3-5- تعیین ژنوتیپ با روش  PCR-RFLP ……………………………………………………………………… 21
   3-5-1- PCR ………………………………………………………………………………………………………………… 21
   3-5-2- پرایمر­های مورد استفاده ………………………………………………………………………………….. 22
3-6- تعیین ژنوتیپ برای چند شکلی GPX1pro198leu ……………………………………………….. 23
3-7- تعیین ژنوتیپ برای چند شکلی SOD1A251G …………………………………………………….. 24
3-8- الکتروفورز …………………………………………………………………………………………………………………. 25
3-9- رنگ­آمیزی ژل ………………………………………………………………………………………………………….. 26
3-10- تحلیل آماری ………………………………………………………………………………………………………….. 27

 

 

 

فصل چهارم: نتایج

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

4-1- مشخصات افراد شرکت کننده در این پژوهش ………………………………………………………… 29
4-2- بررسی عوامل خطر دخیل در رد حاد پیوند کلیه …………………………………………………… 29
4-3- بررسی چند شکلی ژن GPX1 pro198leu درافراد سالم و بیماران ………………………. 31
4-4- بررسی چند شکلی ژن GPX1 pro198leu در بیماران دارای رد حاد و فاقد رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………………………………………………………………………

 

 

 

33
4-5- بررسی چند شکلی ژن SOD1 A251G درافراد سالم و بیماران ……………………………..

36

 

 

 
4-6- بررسی چند شکلی ژن  SOD1 A252G در بیماران دارای رد حاد و فاقد رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………………………………………………………………………………

 

 

 

38

4-7- بررسی همزمان اثر چند شکلی­های GPX1 pro198leu و SOD1 A251G ………….

 

 

 

 40

 

فصل پنجم: بحث و نتیجه­گیری

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

5-1- بحث و نتیجه­گیری ……………………………………………………………………………………………………. 43
5-2- پیشنهادات …………………………………………………………………………………………………………………. 47

 

 

 

 

 

 

 

 

 

فهرست منابع ……………………………………………………………………………………………………………………. 48

 

 

 

فهرست جدول­ها

 

 

 

عنوان                                                                                             صفحه

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

جدول3-1: مشخصات افراد مورد مطالعه …………………………………………………………………………….. 18
جدول 3-2: مواد مورد نیاز برای انجام PCR ………………………………………………………………………. 22
جدول3-3: برنامه تنظیم شده PCR برای تکثیر ژن GPX1 در 26 سیکل ………………………. 23
جدول3-4: قطعات حاصل از هضم آنزیمی برای ژنوتیپ های  چندشکلی ژنتیکی GPX1pro198leu ………………………………………………………………………………………………………………..

 

 

 

24
جدول3-5: برنامه تنظیم شده PCR برای تکثیر ژن SOD1 در 30 سیکل ………………………. 24
جدول3-6: قطعات حاصل از هضم آنزیمی برای ژنوتیپ های  چندشکلی ژنتیکی SOD1A251G ……………………………………………………………………………………………………………………..

 

 

 

25
جدول 4-1: رابطه جنسیت و رد حاد پیوند ………………………………………………………………………… 30
جدول 4-2: رابطه گروه خونی، RH و رد حاد پیوند …………………………………………………………… 30
جدول 4-3:  ارتباط سن در رد پیوند کلیه …………………………………………………………………………. 31
جدول 4-4: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن GPX1 pro198leu درافراد سالم و بیمار ………………………………………………………………………………………………………………………………………

 

 

 

32
جدول 4-5: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن  GPX1  بین گروه سالم و بیماران پیوند کلیه ………………………………………………………………………………………………………………..

 

 

 

32
جدول 4-6: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن GPX1 pro198leu درافراد فاقد ودارای رد حاد ……………………………………………………………………………………………………………………….

 

 

 

33
جدول 4-7: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن  GPX1  در بین گروه دارای رد حاد و فاقد رد حاد …………………………………………………………………………………………………………………

 

 

 

34
جدول  4-8: رابطه منبع بافتی جسد و رد حاد پیوند برای ژن GPX1 …………………………….. 35
جدول 4-9: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن SOD1 A252Gدرافراد سالم و بیمار ..

36

 

 

 
جدول 4- 10: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن  SOD1 در بین گروه سالم و بیماران پیوند کلیه ………………………………………………………………………………………………………………..

 

 

 

37
جدول 4-11: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن SOD1 A252Gدرافراد دارای رد حاد و فاقد رد حاد …………………………………………………………………………………………………………………

 

 

 

38
جدول 4- 12: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن  SOD1  در بین گروه دارا و فاقد رد حاد …………………………………………………………………………………………………………………………..

 

 

 

39
جدول  4-13: رابطه منبع بافتی جسد و رد حاد پیوند برای ژن SOD1 …………………………… 40
جدول 4-14: اثر همزمان چند شکلی­هایGPX1  و SOD1  در افراد سالم و بیمار …………. 41
جدول 4-15: اثر همزمان چند شکلی­هایGPX1  و SOD1  در بیماران دارا و فاقد رد حاد ………………………………………………………………………………………………………………………………………..

 

 

 

41
جدول5-1: فراوانی آللT در جمعیت­های متفاوت ………………………………………………………………. 45
جدول5-2: فراوانی آلل G در جمعیت­های متفاوت ……………………………………………………………. 46

 

فهرست شکل­ها

 

عنوان                                                                                        صفحه

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

شکل 1-1- ساختار ژنتیکی گلوتاتیون­پراکسیداز یک و چند شکلی ژنتیکی GPX1pro198leu ………………………………………………………………………………………………………………

 

 

 

9
شکل 1-2- ساختار ژنتیکی سوپراکسید دسموتاز یک و چندشکلی SOD1 A251G 10
شکل 3-1:نتایج حاصل از PCR -RFLPچند شکلی ژنتیکی GPX1قابل مشاهده بر روی ژل آگاروز ……………………………………………………………………………………………………………………………..

 

 

 

26
شکل 3-2:نتایج حاصل از PCR -RFLPچند شکلی ژنتیکی SOD1قابل مشاهده بر روی ژل آگاروز ……………………………………………………………………………………………………………………………..

 

 

 

27

 

مقدمه

 

 

 

 

 

1-1– پیوند کلیه

 

 

 

پیوند به معنی جابه­جا کردن سلول­ها، بافت­ها یا اندام­های انسانی از یک فرد اهداکننده به یک فرد گیرنده با هدف بازگرداندن عملکرد یا عملکردهایی به بدن است. به مجموع این سلول­ها، بافت­ها و اندام­­ها، پیوند یا گرافت[1] گفته می­شود، که انواع متفاوتی دارد. پیوند از یک فرد به خودش پیوند اتولوگ[2]، بین افرادی یکسان از نظر ژنتیکی پیوند هم­ژن[3]، بین دو فرد از یک گونه پیوند آلوژن[4] و بین افرادی از گونه­های متفاوت پیوند زنوژن[5] گفته می­شود (Abbas et al, 2011).

 

استفاده از روش درمانی پیوند اعضا برای بیماری­های انسانی در نیم­قرن گذشته افزایش قابل توجهی داشته است. از میان اندام­ها قلب، کلیه، کبد، ریه، پانکراس، روده و تیموس و از میان بافت­ها استخوان، تاندون­ها، قرنیه، پوست، دریچه­های قلبی، اعصاب و عروق قابل پیوند زدن هستند. به ترتیب کلیه، کبد و قلب معمول­ترین اندام­های پیوندی در جهان به ­شمار می­روند. در حال حاضر پیوند کلیه، قلب، ریه، کبد، پانکراس و مغز استخوان به طور وسیعی در ایران انجام می­شود.

 

موضوعات: بدون موضوع  لینک ثابت


فرم در حال بارگذاری ...